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《贵州医科大学》 2019年
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IgG受体FcγRIIB对肾脏损伤疾病发展的影响

金筱茜  
【摘要】:目的:探究IgG受体FcγRIIB对肾脏损伤疾病进展的影响。方法:8周龄雄性野生型C57 BL/6及C57 BL/6背景的FcγRIIB~(-/-)小鼠分别随机分成对照组和模型组,每组5只。模型组予20 mg/kg体重腹腔注射顺铂,对照组腹腔注射等量的生理盐水。造模后3天处死小鼠,行Scr和BUN生化检测,肾组织病理HE染色,免疫组化观察小鼠肾组织巨噬细胞(CD68)组织浸润情况以及pSTAT1和c-Maf表达;酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)测小鼠肾组织匀浆MCP-1、IL-6、IL-10和TNF-α含量;流式细胞术测巨噬细胞亚型CD86(M1)和CD206(M2)表达以及巨噬细胞CCR5的表达;q-PCR测小鼠肾组织CCL2,CCL3,CCL4 mRNA相对表达水平。分别提取野生型C57 BL/6及C57 BL/6背景的FcγRIIB~(-/-)小鼠骨髓细胞,应用20 ng/ml M-CSF刺激培养6天形成骨髓来源的巨噬细胞,应用流式细胞术鉴定所得细胞纯度,应用纯度达90%以上的细胞分别经100 ng/ml LPS、10 ng/ml IL-4刺激培养24h后,应用流式细胞术检测巨噬细胞M1型和M2型极化情况。收集终末期肾病病人临床外周血样本提取PBMC,应用q-PCR检测FcγRIIB的相对表达量;流式细胞术检测PBMC CD14~+细胞CCR5的表达;自动临床分析仪测定Scr含量。结果:与WT模型组相比,FcγRIIB~(-/-)模型组BUN和Scr含量均升高(均P0.0001),肾组织匀浆细胞因子(TNF-α、MCP-1、IL-6)含量显著升高(均P0.0001),肾小管坏死评分更高(P0.01),肾脏组织CD68~+巨噬细胞和pSTAT1浸润表达更多(均P0.05),肾脏组织c-Maf表达减少(P0.05),肾组织匀浆CCL2、CCL4 mRNA增加更为明显(均P0.05)。但流式结果显示无论体外极化培养巨噬细胞以及动物模型体内巨噬细胞其亚型分化未见明显差异。终末期肾病患者外周血PBMC FcγRIIB mRNA表达相对较高组,其CD14~+CCR5~+表达相对较低(均P0.05);肾移植术后第一天PBMC CD14~+的CCR5~+表达较低的患者,在术后第七天的Scr含量基本恢复到57-97μmol/L的临床正常水平,但差异不显著。结论:缺乏抑制性受体FcγRIIB可增加顺铂诱导的急性肾损伤小鼠肾组织局部炎性因子和趋化因子的表达,增加巨噬细胞的浸润,加重急性肾损伤病情。FcγRIIB对巨噬细胞的极化过程未见明显影响。终末期肾病患者外周血PBMC CD14~+的CCR5表达与其FcγRIIB表达呈现负性相关关系。
【学位授予单位】:贵州医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2019
【分类号】:R692

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