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《贵州医科大学》 2019年
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母鼠燃煤氟中毒对仔鼠学习记忆及海马区GFAP、BDNF表达的影响

扈丽  
【摘要】:目的:研究母鼠燃煤氟中毒对仔鼠学习记忆及海马区神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和脑源性神经营养因子(BDNF)表达的影响,探讨母鼠慢性氟中毒对仔代神经系统损伤的可能发生机制。方法:112只断乳两周的清洁级SD大鼠(雌鼠96只,雄鼠16只)。按体重将雌鼠随机分为对照组、低氟组、中氟组、高氟组,每组24只,染毒组用地氟病重病区燃煤烘干的当地玉米加工成条状饲料连续染毒150天,饲料含氟量分别为106.0、47.8和24.4 mg/kg,对照组及雄鼠食用正常饲料。分别于染氟第90天、120天、150天时按雌雄2:1合笼交配,合笼交配前,观察雌鼠氟斑牙发生情况,并收集其24h尿液。雌鼠妊娠后继续染毒直至仔鼠断乳,仔鼠断乳后给予正常饲料。于出生后多个时间点观察各组仔鼠体重、头体长和尾长、张耳、长毛、上下门齿及睁眼发育指标达标时间,观察平面翻正反射及悬崖回避反射的发生时间;计算仔鼠脑重系数,采用氟离子选择电极法检测仔鼠尿氟、骨氟、脑氟及母鼠尿氟含量,采用Morris水迷宫检测30日龄仔鼠学习记忆能力,ELISA法检测仔鼠海马组织BDNF含量,Western Blot检测仔鼠海马区GFAP表达水平。结果:1.母鼠青春期及孕哺期燃煤型氟中毒模型的建立:对照组无氟斑牙发生,染氟组出现不同程度氟斑牙,且染氟剂量越高,氟斑牙检出率越高(P0.05);染氟组母鼠合笼交配前尿氟浓度高于对照组(P0.05),且染氟剂量越高,染毒时间越长,尿氟浓度越高。以上结果表明本研究成功复制了青春期氟中毒动物模型,可进行后续实验。2.仔鼠尿、股骨、脑氟含量:同一染毒时间,各染毒组仔鼠尿氟、骨氟及脑氟浓度均高于对照组仔鼠,并且随着染氟时间延长,各组仔鼠尿氟、骨氟及脑氟浓度升高,差异有统计学意义(P0.05)。3.仔鼠生长发育及神经行为反射指标:母鼠染氟90天及120天,各组仔鼠PND1、PND6、PND11体重差异无统计学意义(P0.05),与对照组比较,高氟组仔鼠PND16、PND21体重明显降低(P0.05),母鼠染毒150天,高氟组仔鼠PND11、PND16、PND21及中氟组仔鼠PND21体重比对照组低,差异均有统计学意义(P0.05);母鼠染氟90天和120天,各组仔鼠PND6、PND11、PND16头体长及尾长差异无统计学意义(P0.05),与对照组和低氟组比较,高氟组仔鼠PND21、PND26头体长及尾长缩短,母鼠染毒150天,与对照组比较,高氟组仔鼠PND16、PND21、PND26头体长及尾长缩短,差异有统计学意义(P0.05);各染毒组仔鼠脑重系数、张耳、全身白毛、上下门齿萌出和睁眼,于各染毒时间段与对照组比较差异无统计学意义(P0.05);母鼠不同染毒阶段,与对照组和低氟组相比,高氟组仔鼠完成平面翻正反射的时间延长,差异有统计学意义(P0.05),母鼠染氟150天,高氟组仔鼠完成悬崖回避的时间比对照组仔鼠长,差异有统计学意义(P0.05)。4.仔鼠空间学习记忆能力:母鼠染氟90天、120天,与对照组和低氟组相比,第3、4天,高氟组仔鼠的逃避潜伏期延长(P0.05);母鼠染氟150天,与对照组仔鼠相比,第2、3、4天,高氟组仔鼠逃避潜伏期延长(P0.05),第3、4天,中氟组仔鼠逃避潜伏期延长(P0.05)。母鼠不同染毒阶段,与对照组和低氟组相比,高氟组仔鼠首次达台时间延长(P0.05);母鼠染氟150天,与对照组仔鼠相比,中氟组仔鼠首次达台时间延长(P0.05);母鼠染氟90天和120天,高氟组仔鼠穿越平台次数少于对照组仔鼠(P0.05);母鼠染氟150天,与对照组仔鼠和低氟组仔鼠相比,高氟组仔鼠穿越平台次数减少(P0.05)。5.仔鼠海马组织GFAP、BDNF蛋白的表达情况:同一染毒时间,各组仔鼠海马BDNF含量逐渐降低,与对照组和低氟组相比,母鼠各染氟阶段,高氟组仔鼠海马BDNF含量减少(P0.05);各组仔鼠海马GFAP表达水平逐渐升高,与其它各组仔鼠相比,高氟组仔鼠海马区GFAP表达水平增加(P0.05)。结论:1、母鼠燃煤氟中毒可抑制仔鼠的生长发育;2、母鼠燃煤氟中毒可损害仔鼠的空间学习记忆能力;3、燃煤型氟中毒仔鼠学习记忆能力降低,可能与仔鼠海马区GFAP蛋白表达增强,BDNF蛋白含量降低有关。
【学位授予单位】:贵州医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2019
【分类号】:R599.1

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